Novembre 1997 - n°22
L'équipe d'accueil EA 864 "Pharmacochimie Antiparasitaire Organique et Naturelle" (PAON) est constituée de l'association de 4 laboratoires de la Faculté de Pharmacie:
- le laboratoire de chimie organique des Professeurs José MALDONADO et Patrice VANELLE,
- le laboratoire de pharmacognosie du Professeur Guy BALANSARD,
- le laboratoire de botanique et cryptogamie du Professeur Patrick REGLI,
- le laboratoire de parasitologie du Professeur Pierre TIMON-DAVID (Doyen de la faculté de pharmacie).
Constituée et contractualisée en 1992, cette équipe est née de la volonté des quatre laboratoires de transformer leurs collaborations fructueuses mais occasionnelles en une thématique unique commune à tous.
Des composés nouveaux, extraits de plantes ou obtenus par synthèse, sont proposés par les laboratoires de chimie organique et pharmacognosie et leurs activités pharmacologiques -antiparasitaire et antifongique- sont évaluées par les laboratoires de parasitologie et de cryptogamie.
Le responsable de cette structure importante qui compte 15enseignants-chercheurs -dont 11personnes habilitées à diriger les recherches- est José MALDONADO.
Depuis la création du PAON, environ 300composés nouveaux ont été obtenus, ils ont fait l'objet de plusieurs publications quant à leurs méthodes d'extraction ou de synthèse et leur élucidation de structure. Ces composés appartiennent essentiellement à la famille des saponosides, terpènes et flavones pour les produits d'origine naturelle et à la série hétérocyclique (imidazolés, imidazopyridiniques, imidazonaphthyridiniques ou imidazothiazolés) pour les dérivés de synthèse.
Dans le domaine de la synthèse, le PAON a décrit pour la première fois des réactions de Substitution Radicalaire Nucléophile Unimoléculaire ainsi que des réactions d'Elimination Radicalaire en Chaîne Unimoléculaire sur les squelettes hétérocycliques précités. Ces réactions sont de nouveaux moyens d'accès à des structures originales et sont intéressantes du point de vue de la compréhension des mécanismes réactionnels. En ce qui concerne les substances naturelles, le PAON met plus particulièrement l'accent sur l'étude ethnopharmacologique de plantes traditionnellement utilisées comme antiparasitaires et antifongiques. Ces recherches ont abouti à l'isolement et l'identification d'alcaloïdes, sesquiterpènes et surtout de saponosides actifs.
Des méthodes de purification par chromatographie moyenne et haute pression préparative et semi-préparative, ainsi que des méthodes de dosage par chromatographie liquide haute performance dans des milieux complexes ont été mises au point par l'unité en utilisant notamment un détecteur à barrette de diodes et un détecteur à diffusion de la lumière pour les molécules sans chromophores. Par ailleurs, le PAON a réalisé des études de biotransformation sur des plantes à polyphénols, iridoïdes et saponosides, elles ont permis de montrer des modifications importantes de ces molécules au cours du séchage ou du traitement par certains solvants. La disparition ou l'apparition -selon les cas- de molécules actives expliquent la différence d'activité parfois observée entre la plante et la formulation traditionnelle.
L'évaluation pharmacologique et l'étude du mécanisme d'action se font par les tests classiques antifongiques et antiparasitaires et par deux techniques dont le PAON a la maîtrise: la cytométrie en flux et la microscopie électronique.
La cytométrie en flux est particulièrement performante pour la détection des parasites et le PAON a développé des méthodes pour l'étude par cette technique de protozoaires des genres Plasmodium et Leishmania.
La mise au point d'une technique de marquage de l'ADN parasitaire par le bromure d'éthydium permet par exemple la détection de Plasmodium dans les hématies et la mesure de la parasitémie. Cette technique présente l'avantage d'une lecture rapide sur un grand échantillon de cellules. Elle permet ainsi un meilleur suivi de l'effet antimalarique des molécules in vivo et in vitro et l'établissement de relations doses/réponses.
La microscopie électronique à balayage et à transmission est utilisée par le PAON pour étudier les mécanismes d'action des molécules ayant une activité antifongique. Cette technique est notamment en cours pour l'étude des cibles cellulaires de l'*-hédérine, un saponoside qui présente in vitro une activité antifongique notable. Prochainement, la mise au point d'une méthode couplant la microscopie électronique à transmission et à balayage à des techniques cytochimiques de révélation des polysaccharides sur coupes ultrafines devrait permettre l'évaluation de l'activité pharmacologique des nouveaux composés sur l'ultrastructure de levures pathogènes.
Au-delà de la recherche, le PAON développe aussi en tant qu'équipe d'accueil une activité importante de formation, elle a notamment encadré de 1992 à 1995 douze DEA et six thèses.
Equipe fondatrice de l'IFR "Pathologies transmissibles et pathologies infectieuses tropicales", la démarche du PAON s'inscrit dans la longue tradition marseillaise de recherche, d'enseignement et d'activité clinique pour faire progresser la thérapeutique des maladies parasitaires.
V.CROCHET