Comment passer du bleu de méthylène à la variation de pression ?
Préserver la stérilité est une priorité absolue en pharmaceutique. Il est ainsi notamment obligatoire, pour libérer un lot de production de produits stériles, de contrôler l’étanchéité (intégrité) des flacons, au même titre que les seringues, ampoules, cryotubes, etc. Alternative au test au bleu de méthylène – qui présente plusieurs inconvénients majeurs tels que sa mise en œuvre fastidieuse, son caractère destructif et ses résultats, obtenus après 45 minutes, sujets à l’interprétation humaine – le test par variation de pression est plus rapide, plus précis et traçable. ASC Instrument, spécialiste du sujet, nous explique et compare les deux méthodes…
Bleu de méthylène versus variation de pression… quel protocole ?
→ Le test au bleu de méthylène, réalisé à partir d’un échantillon de flacons, généralement prélevé sur la ligne de remplissage, consiste en une immersion de ces flacons dans une solution du colorant bleu au sein d’un réservoir selon un protocole précis. Le réservoir est fermé et porté à une certaine dépression, pendant une durée elle-même prédéfinie. La pression atmosphérique est ensuite rétablie dans le réservoir, puis un temps de repos est observé. Après ce délai, les flacons sont sortis, rincés et inspectés afin de déceler une éventuelle trace de bleu. Le protocole selon la norme ISO 8871-5, annexe D fixe une valeur de dépression de -27 kPa pendant 10 minutes, puis un temps de repos à pression atmosphérique de 30 min. En cas de fuite, pendant la phase de vide, un peu d’air va être extrait du flacon. Pendant la phase de repos, le vide ainsi créé dans le flacon, va aspirer la solution du bleu dans le flacon.
→ Le test par variation de pression ne fait intervenir que de l’air. Le flacon à tester est inséré dans un moule de test, qui est ensuite fermé hermétiquement. Une pression/dépression de test est établie dans le moule. Il est ensuite isolé de la source de pression/dépression. La variation de la pression dans le moule est maintenant mesurée pendant quelques secondes. Dans le cas d’un défaut d’étanchéité, une petite quantité d’air va se déplacer à travers la fuite de la pression la plus élevée vers la pression la plus basse ; pour un test en vide, de l’intérieur du flacon vers le moule donc. Ceci provoquera une micro-perte de vide dans le moule. Cette variation de pression (delta P) est comparée à un seuil de rejet et l’instrument affiche un résultat Conforme / Non Conforme, ainsi que la valeur de delta P mesurée.
Critère d’acceptation et seuil de rejet…
Pour le test au bleu de méthylène, le critère d’acceptation est « présence/absence de bleu dans le flacon ». Cette présence est contrôlée visuellement ou de façon plus précise et objective par photospectrométrie. L’absence de bleu dans le flacon est considérée comme « pas de fuite ». Il serait plus juste de dire « pas de fuite détectable sous les conditions de test données ».
On peut imaginer qu’une certaine fuite ne soit pas suffisamment importante pour faire sortir de l’air du flacon sous l’influence de la différence de pression du test, ou qu’une petite quantité d’air échappée du flacon n’engendre pas une dépression dans le flacon suffisante pour aspirer la solution dans le flacon (l’air passe plus facilement par un trou qu’un liquide). Quand les conditions de test ont été fixées, ce phénomène a été pris en compte et un certain niveau de fuite acceptable a donc été défini. Tant qu’aucune fuite au-dessus de cette limite n’est constatée, le flacon est jugé « Conforme ».
Pour le test par variation de pression, un seuil de rejet pour la mesure du delta P doit être paramétré. Le choix de ce seuil de rejet est évidemment d’importance cruciale. Souvent on choisit de fixer ce seuil au même niveau que le test au bleu de méthylène utilisé auparavant.
Mais comment établir la corrélation entre les deux méthodes ? La variation de pression engendrée dans un moule de test par une fuite donnée dépend d’un certain nombre de facteurs, parmi lesquels, bien sûr, le différentiel de pression entre l’intérieur du flacon et le moule, mais aussi le volume restant autour du flacon dans le moule. La corrélation entre le test par variation de pression et le test au bleu de méthylène est établie par une étude de transposition. Un certain nombre de flacons sont équipés de fuites étalons de valeurs différentes. Ces flacons sont ensuite testés avec les deux méthodes. Étant donné que la solution de bleu de méthylène peut entrer dans les fuites étalons et colmater celles-ci ou tout au moins changer leur valeur, le test en delta P est réalisé en premier, puis le test au bleu de méthylène. On touche ici d’ailleurs à l’un des avantages du test de delta P : les étalons (témoins positifs et négatifs) restent intacts pendant ce test et peuvent être réutilisées à l’infini !
Les tests en variation de pression donnent les valeurs de delta P pour chacun des flacons étalons. Une courbe de correspondance delta P – débit de fuite peut être tracée. Le test au bleu de méthylène montre à partir de quelle valeur de fuite le bleu entre dans le flacon.
En paramétrant le seuil de rejet en delta P à la valeur de la plus grande fuite qui n’a pas permis au bleu d’entrer dans le flacon, on assure que chaque fuite détectable par le test au bleu de méthylène sera en effet aussi rejetée au test par variation de pression.
Certains fabricants suivent d’autres protocoles de test, plus ou moins inspirés par le test normatif (des temps et/ou niveau de vide différents, combinaison avec pression positive...). La méthode décrite ici est applicable universellement pour établir la corrélation avec la méthode delta P et pour étayer le choix du seuil de rejet. ASC Instrument peut se charger entièrement de cette étude de corrélation.
Des flacons étalons à la procédure de test par variation de pression, réalisée en quelques minutes
Des flacons étalons sont préparés chez ASC Instrument à partir de flacons de production fournis par le client. Ils sont fournis avec un certificat qui atteste de la valeur exacte de la fuite en unité de débit standard (Pa·m3/s, ou, plus habituellement, standard cm3/minute), et la pression de test. Les fuites étalons sont démontables, ce qui permet de contrôler leur valeur facilement. Dans la plupart des cas une vérification annuelle suffit, mais un certain nombre de laboratoires pharmaceutiques optent pour deux fois par an.
En principe, la procédure standard pour contrôler par mesure de delta P des flacons de production pour libérer un lot est la suivante :
1) Sélectionner le cycle de test du flacon à tester
2) Monter le moule correspondant
3) Tester les flacons étalons, vérifier que les valeurs mesurées correspondent à la préconisation (de la qualification)
4) Tester les flacons de production
5) Un nouveau test des Flacons Etalons peut être effectué en fin de lot.
L’étape 2 est réalisée seulement si plusieurs formats sont à tester avec un seul instrument. Changer les moules se fait très facilement et sans outils sur l’ASC 7400F, un équipement développé par les ingénieurs d’ASC Instrument.
L’étape 3 permet de valider également le bon montage et l’étanchéité des moules. Toute cette procédure est effectuée en quelques minutes. Le test d’un flacon ne dure que 30 secondes environ, un autre avantage important par rapport au test au bleu de méthylène : les résultats sont disponibles immédiatement.
Le déroulement d’un cycle est montré ici : https://fr.ascinstrument.com/asc-7400f
Rédiger un rapport de lot n’est plus nécessaire, l’instrument le fait automatiquement, sous format pdf, récupérable via un accès réseau sécurisé. Toutes les informations y sont reprises : identification de l’instrument, dates du dernier étalonnage & numéro de certificat, nom de l’opérateur, nom/numéro du lot, cycle de test avec ses paramètres, avec bien sûr les résultats avec les valeurs mesurées sur chaque flacon.
En conclusion… l’importance d’une transposition de méthode rigoureuse !
La méthode de variation de pression remplace de plus en plus souvent le test traditionnel au bleu de méthylène, qui n’est d’ailleurs plus recommandé par la FDA du fait de son caractère probabiliste. Pour franchir le pas, il est primordial d’effectuer une transposition de méthode rigoureuse. ASC Instrument vous offre tout le support nécessaire pour une transition réussie, dans le strict respect des normes, et vous accompagne ainsi dans l’optimisation de vos processus de contrôle d’intégrité.
Pour en savoir plus :
contact@ascinstrument.com - www.ascinstrument.com
S. D.
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